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一、初始水溫控制 水溫對水中微生物生長和生化耗氧率有很大影響： 因此，在整個測量過程中，水樣的溫度應嚴格控制在20℃±1℃，以保證測量結果的精密度和準確度。 (1) 低溫水樣： 冬季采集的水樣、冷藏保存水樣和冷凍保存水樣的溫度遠低于20℃，可以用溫度計控制，敞口放入在20℃恒溫水浴鍋中進行快速升溫并達到平衡。當水溫達到要求（20±1℃）時，重新測量以減少分析誤差。 (2)高溫水樣： 夏季采集水樣和加熱污染水樣的溫度往往高于20℃，可用溫度計控制，置于20℃恒溫生化培養箱中快速降溫并達到平衡。當水溫達到要求（20±1℃）時，重新測量以減少分析誤差。 二、水樣的pH值調節 水中的大部分微生物都適合在中性或弱堿性（pH=7.2～7.6）的環境中生存。 如果磷酸鹽緩沖溶液用水稀釋，將無法達到足夠的緩沖效果。 首先用pH計或廣泛的pH試紙測試pH值，用鹽酸溶液[c(HCl)=0.5mol/L]或氫氧化鈉溶液[c(NaOH)=0.5mol/L]調節水樣的pH值呈中性或弱堿性后稀釋。調節液的用量不應超過水樣體積的0.5%，操作時注意不要引入氣泡。 如果水樣的酸度或堿度很高，可以用高濃度的堿液或酸液進行中和。 三、水樣含鹽量調整 微生物分解有機物的生化反應必須在營養鹽充足的環境中進行。 如果樣品含鹽量低，電導率小于125μs/cm，則可能因營養鹽不足而影響微生物活性，從而影響水樣BOD5測定結果。 因此，測量前應先用電導率儀檢測水樣的電導率，并在含鹽量低（電導率小于125μs/cm）的水樣中加入等體積的四種鹽溶液，水樣的電導率應調整為 125μs/cm。 四、初始溶解氧調節 微生物分解有機物的生化反應必須在好氧條件下進行。溶解氧濃度影響反應進程。 測量前，必須嚴格控制水樣的初始溶解氧濃度。 ①若水樣初始溶解氧濃度低于2.0mg/L：可采用稀釋或接種稀釋法提高水樣溶解氧濃度。（原因：未能為微生物的生理生化活動提供足夠的溶解氧，使生化反應難以進行）。 ②溶解氧過飽和：從水溫低的水域（冬季）或富營養化湖泊、水庫采集的水樣中可能含有過飽和溶解氧。 測量前，通過初始水溫調節水樣，使水樣快速升溫至20℃，然后將所有水樣轉移至1000mL量筒中，然后搖動量筒5 至 10 次以驅除過飽和溶解氧。否則會造成分析結果偏高（過飽和溶解氧會自行逸出而損失）。 ③負值現象： 從水溫高的水域（夏季）或熱污染排放口采集水樣。在溶解氧濃度低的情況下，通過測量前的初始水溫調節水樣，使水樣快速冷卻至20℃，將水樣全部轉移至1000 mL量筒中，搖動量筒5～10次，利用大氣復氧作用使其與空氣中氧分壓接近平衡。否則，會造成分析結果偏低甚至為負。
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