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BOD5測定原理 稀釋接種法是生化需氧量的標準方法，又稱五日培養法。即取一定量原水樣或稀釋水樣，使其完全充滿密閉培養容器（也就是溶解氧瓶），在20℃±1℃暗處恒溫連續培養五天五夜（5d±4h），測量培養前后水樣的溶解氧濃度，兩者之差稱為五天生化需氧量 ，單位以氧的毫克/升。 水中微生物可降解有機物濃度越高，水中溶解氧消耗越多，BOD值也越高，水質越差。因此，BOD5是一種綜合性的水質指標，間接指示水體中有機物的污染程度，衡量廢水生化處理過程中的凈化效率。它所反映的生物降解性是其他參數無法替代的。 但是，污（廢）水中的各種可生物降解的有機物被微生物完全氧化分解需要很長時間。例如，在20℃培養條件下完成這一過程大約需要100天。為了縮短檢測時間，目前國內外普遍采用BOD5用于近似表征微生物將水和廢水中的有機物完全氧化分解所消耗的溶解氧。BOD5實測值約為終極生化需氧量的70%。 對溶解氧濃度高、有機物含量低的地表水，可直接取樣培養測定； 對于受污染的地表水和大部分工業廢水，由于含有較多的有機物，需要稀釋后再培養測定，以降低有機物濃度，保證溶解氧充足； 對于一些不含或少含有微生物的工業廢水，包括酸性廢水、堿性廢水、高溫廢水、冷凍保存廢水以及經過氯化殺菌處理的廢水等，測量前應在水樣中引入能分解水中有機物的微生物。這種方法就是接種； 對于一些廢水中存在難于被一般生活污水中微生物以正常速度降解有機物或含物質時，可在水樣中接種馴化后的適應微生物。 BOD5分析前的準備工作 （1）分析前4小時啟動恒溫生化培養箱，將培養箱內溫度設置為20℃，使其正常運行（必要時可用水銀溫度計檢測培養箱內溫度， 培養箱內的溫度要嚴格控制在20±1℃)。 （2）分析前檢查BOD5恒溫測量室的室內溫度和空調的運行情況，保持室內溫度在20℃左右，以保證空調穩定正常運行（必要時可用水銀溫度計檢測恒溫測量室內溫度，嚴格控制在20℃±1℃）。 （3）將分析用稀釋水、接種液和接種稀釋水敞口放入恒溫生化培養箱中恒溫，并在24小時內使用。 去除干擾物質 （1）如果水樣中含有大量的活性或惰性大顆粒懸浮物，會干擾BOD5的測定。需要使用超聲波清洗器對水樣進行均質化預處理。具體方法如下： 量取適量水樣，全部轉移至500mL燒杯中，將燒杯放入超聲波清洗槽中，開啟超聲波清洗器，設定作用時間為5min，利用超聲波對液體空化作用。樣品中可見的團塊狀或大顆粒狀懸浮物逐漸破碎并完全溶解，說明已達到充分混合均化的程度，可量取水樣進行測定。 （2）如果水樣中含有藻類，BOD5 測量結果會偏高。測量前，水樣應完全通過孔徑1.6μm濾膜過濾器以去除藻類。 （3）如果水樣中含有少量游離氯（用淀粉-碘化鉀試紙檢測），一般放置1h～2h即可消除干擾。對于游離氯含量高且短時間內不能消散的水樣，可加入亞硫酸鈉溶液，將水樣中的游離氯還原去除。 （4）如果水樣中含有銅、鉛、鋅、鎘、鉻、砷、氰等有毒物質，會干擾BOD5的測定，可使用含有馴化微生物的接種稀釋水進行接種稀釋，或增加稀釋倍數以減少有毒物質濃度。
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